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目次

DNAメチル化研究法

DNAメチル化研究法 (生物化学実験法)

  • 塩田 邦郎(編)/ 服部 中(編)/ 上野川 修一(編集)/ 駒野 徹(編集)/ 志村 憲助(編集)/ 中村 研三(編集)/ 山崎 信行(編集)
  • Ⅰ.ゲノムワイドのメチル化状況の解析
    • Ⅰ-1 Restriction Landmark Genomic Scanning(RLGS)法
    • Ⅰ-2 RLGS法スポットクローニング
    • Ⅰ-3 Virtual Image RLGS(Vi‐RLGS)法
    • Ⅰ-4 メチル化感受性酵素を用いたArbitrarily Primed-PCR(MS-AP-PCR)によるメチル化可変部位の検出
  • Ⅱ.遺伝子断片から遺伝子領域へ
    • Ⅱ-1 Inverse PCR
    • Ⅱ-2 ゲノムライブラリークローンの利用
    • Ⅱ-3 データベースの利用
  • Ⅲ.特定遺伝子やゲノム領域のメチル化状況の解析
    • Ⅲ-1 メチル化感受性制限酵素を用いたサザンブロットによるメチル化状態の検出
    • Ⅲ-2 メチル化感受性制限酵素を用いたPCRによるメチル化状態の検出
    • Ⅲ-3 バイサルファイト反応とシークエンス解析によるDNAメチル化解析
    • Ⅲ-4 バイサルファイトPCRを用いたRestriction Mapping
    • Ⅲ-5 Real‐time PCRを用いたDNAメチル化解析
  • Ⅳ.DNAメチル化と遺伝子発現調節
    • Ⅳ-1 5-アザシチジンとTSA処理
    • Ⅳ-2 メチル化レポーターアッセイ
  • Ⅴ.特殊な状況におけるDNAメチル化解析
    • Ⅴ-1 単一細胞のDNAメチル化解析
  • Ⅵ.細胞内での遺伝子発現状況の解析
    • Ⅵ-1 DNA-FISH
    • Ⅵ-2 RNA-FISH
    • Ⅵ-3 DNA/RNA-FISH用プローブの調製
    • Ⅵ-4 アンチセンスRNA発現の解析
  • Ⅶ.DNAメチル化研究の周辺技術-遺伝子工学手法
    • Ⅶ-1 ノーザン・ハイブリダイゼーション
    • Ⅶ-2 In situハイブリダイゼーション
    • Ⅶ-3 Whole mount in situハイブリダイゼーション
    • Ⅶ-4 ウエスタンブロッティング
    • Ⅶ-5 免疫組織化学
    • Ⅶ-6 GST融合タンパク質の発現と精製
    • Ⅶ-7 培養細胞核抽出物の調製
    • Ⅶ-8 免疫沈降
    • Ⅶ-9 クロマチン免疫沈降法
    • Ⅶ-10 GFP融合タンパク質の利用
    • Ⅶ-11 簡便なDNA抽出法
  • Ⅷ.幹細胞の樹立,維持,分化
    • Ⅷ-1 ES細胞,EG細胞の培養
    • Ⅷ-2 ES細胞からの胚様体の作製
    • Ⅷ-3 TS細胞の樹立と維持,分化
    • Ⅷ-4 神経幹細胞の樹立と初代培養
    • Ⅷ-5 骨髄間質細胞の樹立と培養